梯度PCR基因擴(kuò)增儀是利用PCR(聚合酶鏈反應(yīng))技術(shù)對特定DNA擴(kuò)增的一種儀器設(shè)備,被廣泛運(yùn)用于醫(yī)學(xué)、生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室中,例如用于判斷檢體中是否會(huì)表現(xiàn)某遺傳疾病的圖譜、傳染病的診斷、基因復(fù)制以及親子鑒定等。
PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))體外酶促合成特異DNA片段的一種方法,由高溫變性、低溫退火及適溫延伸等幾步反應(yīng)組成一個(gè)周期,循環(huán)進(jìn)行,使目的DNA得以迅速擴(kuò)增,具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、操作簡便、省時(shí)等特點(diǎn)。
PCR基因擴(kuò)增儀主要作用原理與基本計(jì)量儀器相似,對計(jì)量要素要求較高,一旦失控,儀器將不能正常工作,所以PCR基因擴(kuò)增儀也需要定期保養(yǎng)。
梯度PCR基因擴(kuò)增儀的維護(hù)保養(yǎng)中需要注意的問題:
1、PCR基因擴(kuò)增儀需要定期檢測,一般半年至少一次。
2、PCR反應(yīng)的要求溫度與實(shí)際分布的反應(yīng)溫度是不一致的,當(dāng)檢測發(fā)現(xiàn)各孔平均溫度差偏離設(shè)置溫度大于1~2℃時(shí),可以運(yùn)用溫度修正法糾正PCR實(shí)際反應(yīng)溫度差。
3、PCR反應(yīng)過程的關(guān)鍵是升、降溫過程的時(shí)間控制,要求越短越好,當(dāng)PCR儀的降溫過程超過60s,就應(yīng)該檢查儀器的制冷系統(tǒng),對風(fēng)冷制冷的PCR儀要清理反應(yīng)底座的灰塵;對其他制冷系統(tǒng)應(yīng)檢查相關(guān)的制冷部件。
4、一般情況如能采用溫度修正法糾正梯度PCR基因擴(kuò)增儀的溫度時(shí),不要輕易打開或調(diào)整儀器的電子控制部件,必要時(shí)要請維修人員修理或利用儀器電子線路詳細(xì)圖紙進(jìn)行維修。